不同级别的层流手术室其空气洁净度标准不同，例如国内标准I级层流手术室的标准为洁净度5级，每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数，≤100颗或每升空气中≤3.5 颗。II级层流手术室的标准为洁净度6级，每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数，≤1000颗或每升空气中≤35颗。III级层流手术室的标准为洁净度7级，每立方尺空气中≥0.5μm的尘粒数，≤10000颗或每升空气中≤352颗。依次类推。
层流手术室-需保持洁净舒适的工作环境
要求：
（1）进入手术室必须更换洗手衣裤、鞋帽。
（2）严格控制入室人数。
（3）尽量减少层流手术室的开门次数与时间（更不可将门打开不关），维持"相对密闭状态"，以防外来污染的进入。
（4）手术前用酒精擦拭室内物品、医疗程仪器、设备等。
（5）术后及时、彻底清洁室内所有物品、墙壁及地面。
（6）妇女不可用粉、头发喷雾剂和指甲油之类的化妆品，以减少污染来源。
（7）工作服应选用不易产生静电、不易脱落纤维的涤纶和尼龙织物。
（8）定期检测层流系统功能状态，测试层流手术室环境空气洁净度指标和细菌培养等。
总之，使用层流手术室，强化无菌观念和正规化管理仍然是医疗程安全的根本保证与要求，仍然是手术室工作之根本、之重点，只有当两者紧密结合起来才是趋于完美的。
层流手术室的设计
坐南朝北，位于建筑的较高处，以保持空气洁净、防止院内感染为原则，地面、墙壁可以冲洗。要三区划分合理：即有非限制区、半限制区、限制区。要有三通道：即工作人员通道、病人出入通道、污物出口通道。材料应防火、耐湿、不易着色，以具有易于清洁等性能的材料为宜。现代化手术室应设计有：空气净化装置、中心供氧、中心吸引等装置。
